注射多巴胺的作用？
多巴胺（dopamine，DA）是脑内一种重要的神经递质，它可以通过直接刺激中枢神经系统来调节生理功能，还可以通过与其他神经递质相互作用来实现其生理作用 。目前，对于多巴胺的研究多集中在它的生理和药理作用上，而对于其在体内的动态变化规律及其影响因素研究较少。本实验通过建立大鼠急性缺氧缺血模型，研究不同年龄（2～3月、6个月、12个月）、不同性别大鼠在常氧和缺氧环境下血浆及脑组织中多巴胺的动态变化，并探讨高龄、动脉硬化对其的影响。为今后深入研究多巴胺提供参考依据。
1材料与方法 1.1动物与试剂 健康清洁级Wistar大鼠94只，雌雄各半，体重180～220g；多巴胺（DPO）及3，4-二羟苯乙胺（DOPEA）标准品均购自美国Sigma公司；氢溴酸右旋糖酐钠购自北京益福有限公司；异丙肾上腺素（Isoprene）购于上海西邦生物科技有限公司；其他试剂均为市售分析纯。
1.2仪器与设备 电子天平（BP211D型），离心机（TGL-16G型），冷冻干燥机（FD-1A-50型），荧光分光光度计（RF5301PC型），全自动生化分析仪（AU5400型）等。
1.3方法 1.3.1实验动物分组设置 根据以上条件将动物随机分为7组，分别为老年对照组（2月龄，10只），青年对照组（3月龄，10只），老年实验组（2月龄，10只）和青年实验组（3月龄，10只）以及低、高剂量给药组（6月龄，各10只），另设一空白对照组（不给予药物，10只）。 注：老年对照组和老年实验组大鼠是在同一环境中饲养并给予相同饲料，只是老年对照组不做任何处理，而老年实验组腹腔注射给予盐酸多奈哌齐2mg/kg·d）。其余各组大鼠在实验期间均给予盐酸多奈哌齐2mg/（kg：d），每日一次，连续30天。
1.3.2血清和脑组织的采集和处理 大鼠用10%水合氯醛（350mg/kg）麻醉，开胸取血，分离血浆和脑匀浆，置于-20℃冰箱冻结待测。血浆中的多巴胺采用荧光法测定[5]；脑组织中的多巴胺采用高效液相色谱法测定。
1.3.3脑组织单胺类神经递质的含量 取适量脑组织加入9mmol/L盐酸溶液充分研磨，制成10%的组织匀浆，以3000r/min的速度离心10分钟，取上清液，用高压灭菌的去离子水溶解沉淀，制成10%的匀浆液备用。分别取上述匀浆液各20μl，加入10%盐酸溶液2ml、饱和氯化钠溶液2ml、对氨基苯甲酸乙酯重氮盐溶液3ml，混合均匀后置沸水浴中加热15分钟，冷却后用盐酸溶液调至中性，以0.45um的微孔滤膜抽滤，收集滤液。按上述方法制备不含多巴胺的脑组织匀浆液作为空白。各取5ul滤液加入含有0.5mmol/L对氨基苯甲酸乙醇溶液5ul、1mol/L醋酸钠溶液5ul、混合酸酐溶液3ul混匀后置于37℃温箱反应45分钟后，加入1滴乙酸汞溶液使混合物变澄清，再用盐酸溶液调至中性，以0.22um的微孔滤膜过滤，收集滤液，测定滤液中的多巴胺含量。
结果 2.1实验动物的一般情况 所有大鼠均进入实验，实验过程中无死亡发生。 2.2血浆和脑组织中多巴胺的变化 结果见表1~3。
由表1可见，与同龄青年大鼠相比，老年大鼠血浆中多巴胺的含量显著降低（P<0.05）。皮下注射盐酸多奈哌齐后可引起老年大鼠血浆中多巴胺升高。
由表2可见，与同龄青年大鼠相比，老化脑组织中多巴胺的含量显著降低（P<00.5)，老年大鼠脑组织中多巴胺低于同时期血浆中多巴胺的水平。皮下注射盐酸多奈哌齐可明显提高衰老大鼠脑组织中多巴胺的含量。
由表3可见，与青春大鼠相比，老年大鼠血浆中5－羟色胺、去甲肾上腺素和5－羟吲哚乙酸含量无明显变化；老年大鼠脑组织中的5－羟色胺和去甲肾上腺素含量显著性低于青春大鼠（P＜0.05），而5－羟吲哚乙酸的含量则较高。
注：经Spearman相关分析显示，除高龄组外，各实验组的血清和脑组织中多巴胺含量呈显著正相关（P＜0.05）；年龄（高龄组除外）和性别亦会影响多巴胺的含量，但无显著相关性（P＞0.05）。
讨论 三胺是多巴胺能神经递质的主要储存形式，有报道认为三胺可以逆转多巴胺能神经元的衰退[6]，因此检测血液中三胺的含量可以反映机体多巴胺能神经末梢的功能状况。 一般认为，随着年龄增长，大脑内多巴胺能神经元数量逐渐减少，多巴胺能突触传递效率下降导致大脑皮层、海马体等部位结构的功能改变，继而引发老年相关的认知障碍和精神病的发生[7]。本研究中，老年大鼠血浆和脑组织中多巴胺含量都显著低于青年大鼠，且老年大鼠在注射盐酸多奈哌齐后，血浆和脑组织中多巴胺明显增加，说明随着年龄的增长，大脑内多巴胺能机制可能逐步减弱，外源给药可使之恢复。
本研究结果还显示，老年大鼠除血浆和脑组织中多巴胺的含量较低以外，血浆和脑组织中的5－羟色胺、去甲肾上腺素及5－羟吲哚乙酸的含量均较年轻大鼠有所上升，这可能也是老年人出现情绪低落、焦虑烦躁等精神症状的原因之一。尚有研究表明，与青少年和中年人群比较，老年人群血清和脑脊液中去甲肾上腺素、5－羟色胺和5－