碳酸蓝有什么作用？
做实验嘛，要的是结果，先放结论好了。在蛋白纯化的时候，用盐酸调pH，可以显著提高填料对蛋白的吸附容量和洗涤回收率，而且用硫酸调回原pH，可以使蛋白质很好地释放出来。 但是这样直接加酸调pH到需要的值是不可行的…… 首先，酸度太大会对细胞产生很大刺激（我试过用0.1N的HCl浸泡酵母细胞，没等浸泡完就大量细胞死亡了）；其次，就算能行，操作也很麻烦，而且很难控制。 所以我想到了用K2CO3中和HCl，生成NaHCO3沉淀，然后过滤去掉K2CO3、NaHCO3以及未吸附的蛋白。这样既达到了目的，又省去了调pH到合适值这一步（因为滤液中本来就含有NaHCO3，不用另外加入了）。
接下来就是准备材料开始做了——分别称取一定质量的氯丙烯腈聚合物（填料）和盐酸（催化剂），倒入两个锥形瓶中并各自加入50ml水稀释。随后依次进行如下操作： 第一步，先用氢氧化钠溶液调pH至6-7（比原来升高了近4个单位！！可以看到有白色絮状物出现并且迅速增多，这应该就是蛋白聚糖） 第二步，加入乙醚振荡萃取，分出下层液体。 第三步，水洗沉淀一次（这里我用的是超纯水，为了洗去表面残留的蛋白） 第四步，用盐酸调pH至4左右，观察到白色絮状物消失，并且没有新的生成。 第五步，用氢氧化钠溶液调回原pH，静置半小时后看到白色絮状物重新出现。 第六步，重复第二步骤萃取。 第七步，用氨水调pH至9以上，这时能看到白色絮状物已经完全溶解。 第八步，用硫酸调至酸性（具体浓度和时间根据具体情况而定，目的是将多余的胺基酰基团转化成酰胺基团，从而增加与蛋白质的亲和力） 第九步，用氯丙烯睛聚合物的溶剂（甲苯/乙酸乙酯混合液）反复冲洗，充分洗涤后抽干（注意：此步骤千万不能用单丁醇，否则会破坏蛋白质的结构，使其变性） 用不同的方法处理同样一种物质，其效果可能天差地别，所以科研并没有我们想象的那样“高大上”，其实很多时候就差那么一点点而已。如果这次试验成功了，说不定下一个突破就在眼前了~~