dna提取试剂的作用是什么?
答主本科学的是生物信息学,对分子生物学有一些了解,就凭这些知识尝试回答一下这个问题吧。 首先,DNA(Deoxyribonucleic acid)是遗传信息的载体,它是由多条单链构成的双螺旋结构,就像电脑中的硬盘一样,由无数个盘片组成。
每条单链都有5个碱基(A、T、G、C和U),而每个碱基都有对应的嘌呤或嘧啶。5种碱基按一定的顺序排列,构成了 DNA的核苷酸序列,这个序列记录了生命发展过程中的各种信息。 如果要研究基因(Gene,又称为遗传密码,是由DNA分子的核苷酸序列表达出来的片段),那么就要把DNA双链解开,然后逐个核苷酸序列地读取,这个过程就是提取DNA。 目前提取DNA的方法有很多,常见的有酚/氯仿抽提法、乙醇沉淀法等,这些方法基本原理是把DNA从细胞里提取出来,然后把DNA聚集在一起。
然而,细胞里面除了有DNA之外,还有很多其他成分,如RNA、蛋白等等。所以,这种方法得到的DNA纯度不高,需要进一步纯化。 而DNA提取试剂正是起着提高DNA纯度的作用,让研究人员能够更容易地阅读包含在DNA序列里的遗传信息。 根据作用机理的不同,目前市面上的 DNA提取试剂可分为两大类。 一类是以苯酚和氯仿为代表的溶解性试剂,可以在较低的温度下溶解细胞膜,让DNA从细胞中释放出来,但这一过程会产生蛋白降解产物;另一类是以异丙醇为基础的脱水剂,可以通过沉淀的方式从溶液中分离出DNA,该方法对蛋白质的损伤较小,适用于含有RNA的核酸样品。
有些DNA提取试剂还有额外的功能,例如增加DNA的浓度,或者使DNA更易溶于水。 对于不同的实验场景,可以选择合适功能的DNA提取试剂。以用于细菌基因组DNA提取为例,通常可以先将菌体打碎后,用酚/氯仿等溶解性试剂提取,再用醋酸钠和乙醇沉淀得到DNA。对于体积较小的细胞(小于2 μm)可以用研磨的方式,直接将细胞磨碎,然后用溶解性试剂提取。而较大的细胞(大于2μm)则需要用液氮冷冻,破碎细胞后,再提取其中的DNA。
随着技术的发展,如今已经有不少公司推出了基于新技术的DNA提取试剂,如基于磁珠的DNA提取试剂盒,利用磁珠的特异性,可以直接从溶液中提取DNA,无需添加溶菌剂。
总之,DNA提取试剂的作用在于从样本中分离出 DNA,以便进行下一步的分析。