脱气的作用如何脱气?

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在制备蛋白质类药物时,常需要将含有蛋白的溶液进行脱气处理(Drying)。 所谓脱气就是去除液体中的气体分子,一般采用真空浓缩的方法。

由于微生物细胞中含有70%以上的空隙,且细胞膜具有通透性,故用真空泵抽去培养液中的气体很容易使细胞破裂。若进一步加热,还可加速细胞的破碎过程。在培养结束后,将液体置于真空度为40~50毫米汞柱的下封入容器内,放置过夜即可除去大部分气体。当然,最后残存的少量气体必须通过其他方法如冷冻干燥等彻底除去。 因为生物大分子的结构都具有三维立体构像,而小分子的溶剂化作用又受温度和压力的影响,故在进行分子生物学实验时常需进行脱水、冻干操作。其目的是去除组织样品或酶制剂中所含有的水分,使分析结果更接近实际含量。

1.减少误差 由于溶剂的密度大于水,因此当用溶剂提取样品时,部分溶剂会进入样品细胞,溶解在细胞液的溶质就会部分转移到溶剂中。细胞的体积缩小,对溶质的吸附能力便会降低;经过反复提取多次,细胞内的物质被逐步释放出来,最后达到平衡状态,此时所得溶质的含量虽比直接用于分析的高些,但存在由溶剂引起的误差。若先用适量溶剂浸没样品,再抽出溶剂,这样可使错误减小。

2.避免破坏 有些化学试剂的溶解度随温度的升高而加快,若在低温条件下抽提,可减慢反应速率,从而避免对成分的反应活性影响太大;对于分子量较大的高分子化合物来说,低温还能延缓其聚合成聚合物的情况发生。另外,对于一些易被氧化剂氧化的物质,也应控制反应温度。可见,适当提高操作温度能有效地防止一些化学反应的发生,保证对目标产物进行正确的测定。

3.节省时间 若直接将含有药物的原料浸没于有机溶剂中,待药物提取出来后再进行有机溶剂回收等后处理工作,如此费时费力,而且效率低下。若采取先溶解药物,再用萃取等方法分离提纯的步骤则可以有效节约时间。

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